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更新时间:2015-06-29有效期:永久有效浏览    次 我要评论()
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香菇 菌种 培养基 操作 程序
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详细信息

 1、选择优质马铃薯,去皮或挖去发芽眼,削去发青皮,切成薄片,称取200克,置于钢精锅,加水1 000毫升,煮沸后小火保持30分钟,趁热用8层纱布过滤后放人有1 000毫升刻度的量杯(或量筒)中,补充水到1 000毫升,倒回钢精锅,加琼脂继续加热,待琼脂溶化后,再加葡萄糖,再补水至1000毫升,用玻璃棒搅均匀,趁热分装试管,或装入三角瓶备用。

  2、分装试管,将配制好的PDA培养基,趁热(60℃)倒人事先准备好的量杯或玻璃漏斗,分装试管。每支试管装培养基为管长的1/4,培养液不可贴附管口内壁,如有沾附物必须揩拭干净。

  3、做棉塞,取适量棉花做成较紧实的棉塞,塞入试管约2厘米左右,外留1厘米,紧贴试管内壁,松紧度以用手指提起棉塞而不脱掉为宜,光圆不起皱(如图3—1),尔后将试管放入铁丝筐内。

  4、灭 菌,将装有培养基的试管放人灭菌锅的铁丝筐内,上面盖上牛皮纸或聚丙烯塑料薄膜,包扎好,以防棉塞受潮。加热灭菌时,排尽锅内的冷气,当温度升到121℃时,维持30分钟后停止加热。待指针回到零点,先打开锅盖的1/10开度,等到无直冲蒸气时,再打开全部锅盖,取出试管。

  5、在斜面上摆放试管,将取出的试管冷却到50~60℃后,放到用木架或木条摆成一定角度的斜面上,小试管斜面长2厘米,大试管(18×200)斜面长6厘米左右。待完全凝固后,收取备用。

  6、灭菌效果检查,随机取3管斜面,放在28℃下进行空白培养5~7天后,检查斜面上有无细菌和霉菌菌落。如果发现有杂菌,说明灭菌不彻底,要重新灭菌。

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